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MA plot即M-versus-A plot,在芯片数据处理出现之前也称为Bland-Altman plot,是由发明者名字命名的,而MA plot是对M与A作图而得名,M是minus的缩写,代表两个值之差,A是add的缩写,代表两个值之和。有研究者也把MA plot称为Ratio-Intensity (RI) plots,同时MA也正好是micro-array的简写。
MA图主要应用在基因组数据可视化方面,实现数据分布情况的展示。早期主要应用于DNA芯片数据,现在常用于高通量测序数据中基因差异表达分析结果的展示。
M一般做Y轴,A一般做X轴。
M常对应差异表达分析获得的差异对比组之间基因表达变化log2FC。
A可以利用差异对比组的FPKM进行计算,以R和G来表示差异对比组的话,可以取R组基因的平均FPKM和G组基因的平均FPKM进行计算。
首先准备数据:
第一列为基因ID,*_FPKM为样品FPKM值(列名必须包含"FPKM"),第四列为FDR,第五列为log2FC,第六列为基因上下调信息。
然后,我们使用R语言来绘制MA图,代码如下:
### load library require(ggplot2) library(RColorBrewer) library(getopt) mycol<-brewer.pal(9, "Set1") # load library args <-commandArgs(TRUE) # check args length if( length(args) != 2 ) { print(args) usage() stop("the length of args != 6") } plot_MA <- function(log10exp=NULL, log2FC=NULL, FDR=NULL, Significant=NULL, xlab="log10(FPKM)", ylab="log2(FC)", main="MA plot") { # check args # check null if( is.null(log2FC) ) stop("log2FC is NULL") if( is.null(FDR) ) stop("FDR is NULL") if( is.null(Significant) ) stop("Significant is NULL") # check length len <- c(length(log10exp), length(log2FC), length(FDR)) if( len[1] != len[2] ) stop(paste("length(log10exp) != length(log2FC): ", len[1], " != ", len[2], sep="")) if( len[2] != len[3] ) stop(paste("length(log2FC) != length(FDR): ", len[2], " != ", len[3], sep="")) if( len[1] == 0 ) stop("length(log2FC) == 0") # plot Significant<-factor(Significant,levels=c("up","down","normal")) p <- qplot(log10exp, log2FC, xlab=xlab, ylab=ylab, main=main, size=I(0.7), colour=Significant) p <- p+ scale_color_manual(values = c("up"=mycol[1],"normal"=mycol[2],"down"=mycol[3])) p<-p+theme_bw()+ theme( panel.grid=element_blank(), axis.text.x=element_text(colour="black"), axis.text.y=element_text(colour="black"), panel.border=element_rect(colour = "black"), legend.key = element_blank(), legend.title = element_blank()) # return return(p) } ori_data <- read.delim(args[1], row.names = 1, header=TRUE,check.names =F) colnames(ori_data)<-read.delim(args[1], row.names = 1, header=F,check.names =F,stringsAsFactors=F,nrows=1) f <- grepl("FPKM",colnames(ori_data)) print(f) fpkm <- ori_data[ , f] log2FC <- ori_data[ , "log2FC"] FDR <- ori_data[ ,"FDR"] significant <- ori_data[ , "regulated"] significant<-as.factor(significant) print(" MA plot") # MA plot ma <- plot_MA(log10exp=log10(rowMeans(fpkm)), log2FC=log2FC, FDR=FDR, Significant=significant ) png(filename=paste(args[2],".png",sep=""), height = 3000, width = 3000, res = 500, units = "px") print(ma) dev.off() pdf(file=paste(args[2],".pdf",sep=""), height = 15, width = 15) print(ma) dev.off()
脚本运行命令:
Rscript plot_MA.R ref_trans_full_table.xls MA
其中ref_trans_full_table.xls是输入文件,MA是输出图片的名称前缀。
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